一、PCR實驗室四要素

1、試劑準備區

         用于試驗試劑的準備。該區域為正壓，目的是防止污染物質溢入。該區域內部又可分為3個區域：普通提取試劑的準備區、PCR試劑準備區和PCR主反應液準備區。在普通提取試劑的準備區內準備一些樣品核酸提取時所需的裂解液、提取液等；PCR試劑準備區用于PCR試劑的制備和保存。例如準備引物、探針等PCR試劑。為了防止交叉污染，避免反復冷凍和解凍，試劑存貯溶液應該被平均為小的工作體積，儲存在這個房間以備后用：PCR主反應液準備區將進行主反應混合液(除了樣品。所有PCR所需試劑的混合)添加到PCR管的操作。重要提示：不能將其它房間的材料(包括擴增、模板和目標核酸或陽性對照、供應品、或設備)帶進試劑準備區。

2、樣品準備區

         該區域無壓力設置要求。該區域是用于對樣品進行分樣，將樣品進行研磨、粉碎、勻漿的區域。由于在這些粉碎、研磨和勻漿處理過程中會產生氣溶膠，因此，存在陽性樣品污染后續操作的可能性。該區域與后面的區域應嚴格隔離，應放在與后面的三個區域隔開的獨立的房間中。在樣品準備區內還可設立一個專用的封閉區或房間用于樣品的接收和儲存。這個房間可以放置冰箱用于樣品儲存，應該和樣品準備區其它區域隔離開。樣品準備區域的人員不得進入試劑準備區。

3、核酸提取區

         核酸提取區是進行樣品核酸提取的區域。該區域為負壓，目的是防止核酸溢出造成污染。樣品準備區又包括從樣品中進行核酸提取和純化的區域以及將核酸加到包含PCR主反應混合液管中的操作區域。添加完樣品后，PCR管的蓋子要盡可能快地蓋好。使用PCR板和膠蓋時，陽性對照和含目標序列的樣品要與待測樣本分開操作，以避免模板添加時造成交叉污染

4、擴增和產品檢測區

         該區域是用來進行PCR擴增和PCR分析的。PER儀放置在這個區域。房間保持負壓，目的是防止核酸溢出。在該區域人員一定要一直穿戴工作服和手套，在離開房間前脫去，防止擴增子污染其它地點。所有用于擴增和產品檢測的設備要用于這個房間。PCR分析]二作也設置在該區域，例如：酶切、測序、克隆等，但實驗室應盡可能把這些活動分隔在不同區域或不同房間。以降低擴增產物的污染風險。如果沒有條件在該區域設立負壓，此區域必須建立排風裝置。

二、PCR實驗室的功能分區

1、基因擴增實驗室的設計通常有四大分區：試劑儲存和準備區、標本制備區、核算擴增區、產物分析區。這四個分區原本就不需要連接在一起，且在物理空間上必須是獨立的，各區域無論在空間上還是在使用中，應處于的分隔狀態，不能有空氣的直接相通。

2、PCR實驗室的功能區分布：

① 基因擴增實驗室的用房分區可分散布置，可集中布置；集中布置的分布原則是依次排列、獨立分區；4個基本分區可根據需要進行遞增/減。如下為PCR實驗室功能分區的常見布局

② 建筑上，緩沖間是阻隔空氣交換的首要措施

③ 進入工作區域應嚴格按照單一方向進行，即：試劑儲存和準備區——標本制備區——核算擴增區——產物分析區

三、PCR實驗室類型

         PCR實驗室可以是分散形式，也可以是組合形式。完成一組PCR實驗，通常應經過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產物分析四個實驗過程，若實驗工藝需要，還應增加樣品粉碎過程。

①分散形式PCR實驗室：

         所謂分散形式PCR實驗室，是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠，呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實驗室建設設計，由于各個實驗之間不易相互干擾，因此無需特殊條件要求。

②組合形式PCR實驗室：

         所謂組合形式, 是指完成基因擴增四個實驗過程的實驗用房相鄰布置，組成獨立實驗區域的形式。對于組合形式PCR實驗室的建設設計，由于各個實驗間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統具有一定的要求。各室在入口處設緩沖間，以減少室內外空氣交換。

WOL 承接 PCR檢測實驗室 無菌操作室 設計裝修

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